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人源化抗体的表达体系

发布时间:2021-11-15 14:46      浏览量:2066

人源化抗体主要是通过基因克隆和DNA重组技术修饰的小鼠单克隆抗体。大多数氨基酸序列被人序列所取代,基本上保留了亲本小鼠单克隆抗体的亲和力和特异性,同时降低了其异质性,有利于其在人体中的应用。经过多年的研究和改进,人们创造和完善了重构抗体、表面重塑抗体、去免疫抗体、链替换抗体等多种人源化抗体技术。下面由莱德伯特(北京)生物科技有限公司为您介绍一下人源化抗体的表达体系。

1、大肠杆菌表达体系

由于完整抗体分子是由重链和轻链通过二硫键组装而成的生物功能免疫球蛋白,而大肠杆菌体系缺少转录及翻译后加工机制,表达的蛋白质不能形成适当的折叠。进行糖基化修饰或正确形成二硫键等,因此不适合完整抗体分子的表达。因此,该方法更适合于Fv、Fab、ScFv等功能片段的高效表达。

2、酵母表达体系

表达系统主要有酿酒酵母、裂殖酵母、克鲁维酸酵母、甲醇酵母菌等,其中甲醇酵母表达系统应用最为广泛。巴斯德毕赤酵母系统是目前应用最广泛的甲醇酵母菌之一。

3、昆虫杆状病毒表达系统

昆虫杆状病毒表达系统是一种优良的真核基因表达系统。昆虫细胞具有来源广、相对经济、翻译后处理正确、蛋白质糖基化等优点,在外源基因表达中得到了广泛的应用。

然而,该系统也存在一个缺点,即病毒感染会导致细胞死亡,因此在大规模生产中存在一定困难。

4、哺乳动物细胞系统

该表达系统经翻译后可适当修饰,且遗传稳定,是嵌合抗体的最适宿主。其中,常用的宿主细胞有三种:非洲绿猴肾细胞;骨髓瘤细胞;中国仓鼠卵巢细胞。利用这些细胞,成功表达了许多人单克隆抗体。

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5、植物细胞表达系统

植物细胞具有与动物细胞相同的蛋白质合成、分泌、折叠和翻译后修饰途径,但蛋白质的糖基化与动物细胞略有不同。抗体可以在植物的叶子和果实中表达而不丧失其结合的特异性和亲和力。

6、转基因动物表达系统

转基因动物药物具有生产成本低、投资周期短、表达高、与天然产物完全一致、易于分离纯化等优点,特别适用于某些使用量大、结构复杂的血液因子,如人血红蛋白、人血清白蛋白、蛋白C、纤维蛋白原和抗体等。

近年来,学术界和企业对治疗性抗体的研究越来越受到关注。人源化抗体和完全人源化抗体的出现为治疗性抗体的广泛应用带来了新的希望。

目前,抗体的人性化方法仍在发展和完善,其目的是提高抗体亲和力,减少抗体异质性,并考虑到抗体的免疫激活。另外,对于不同的异质抗体,选择合适的人性化途径构建更适合临床应用的人源化抗体,将为新药的开发和一些疑难疾病的治疗开辟新的途径。目前Beacon这款仪器具备了单细胞光导系统通过整合光电定位技术和微流控技术,实现了在芯片的纳升级小室中,基于单个细胞的高通量细胞生物学研究,对抗体发现这方面有着重大的意义。

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