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莱德伯特为你介绍基因转导技术

发布时间:2021-11-08 14:02      浏览量:1679

基因转导包括将目标基因导入细胞,然后在工作后观察生物行为的变化,以了解基因的功能。它是研究基因功能最广泛、最成熟的方法之一。然而,基因表达受两个因素的影响:转导效率和表达稳定性。接下来莱德伯特(北京)生物科技有限公司将向您介绍基因转导技术。

利用分子生物学技术,将外源基因或基因组DNA人工导入细胞,观察其在细胞中的表达,研究其生物学特性和功能。这种将基因导入细胞的技术称为基因转导或基因转移,也称为导入。研究基因的表达、结构和功能是一种重要的研究方法。

基因转导技术的主要方法有物理方法、化学方法和生物方法。

1、物理方法:DNA自体移植注射是最简单的靶基因导入方法,但注射量有限,可用细胞有限,细胞转化率很低。因此,经常使用多点局部注入。

靶基因包被金属后,包被靶基因的金属颗粒通过高压传输器加速进入细胞,从而提高肿瘤细胞的转化率。

2、化学方法:脂质体载体法具有安全、简便、低毒、无免疫原性等优点。适用于靶器官的注射转移,具有一定的转移效率。这是继病毒载体转移之后又一种有价值的体内基因转移方法。

受体介导法利用肝细胞上丰富的转移因子和糖蛋白受体的特性,合成多种阳离子氨基酸,然后将转移因子与靶基因连接形成复合物,通过与肝细胞表面受体结合的方式转移靶基因。

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然而,受体介导的内吞小泡可以转运到溶酶体中,并容易被溶酶体降解,导致靶基因表达时间短,表达效率低。腺病毒能与内吞囊泡融合,破坏囊泡,释放外源DNA,提高转化效率。

3、生物学方法:逆转录病毒构建简单,外源基因最大容量为8KB,整合到宿主细胞基因组中,无病毒蛋白表达。然而,它只能在分裂过程中感染细胞,在体内滴度较低。随机整合导致“插入突变”。

腺病毒是近年来报道最多的肝癌干细胞基因治疗病毒载体之一。外源基因的最大容量为35kb。它没有整合到宿主细胞基因组中,从而避免了插入突变的风险,并且可以高度分裂和不分裂细胞。但易引起宿主免疫应答,降低转染效率。

应用转导是细菌遗传学中的一种常用方法。它可以用来将基因从一种细菌转移到另一种细菌,进行互补实验,绘制基因图谱,特别是通过共转导分析它们的精细结构。而Beacon这款仪器具备了单细胞光导系统通过整合光电定位技术和微流控技术,实现了在芯片的纳升级小室中,基于单个细胞的高通量细胞生物学研究,对基因研究这方面有着重大的意义。

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