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细胞培养技术的特点与增殖过程

发布时间:2021-10-25 14:53      浏览量:1892

从体内取出组织或细胞,模拟体内外的生理环境,在无菌、适宜的温度和一定的营养条件下培养这些组织或细胞,以保持一定的结构和功能,供我们观察和研究。这种方法是细胞培养。有时细胞培养也称为组织培养。让我们来介绍莱德伯特(北京)生物科技有限公司的细胞培养技术的特点与增殖过程。

细胞培养始于20世纪初,广泛应用于生物学和医学的各个领域。它是各种细胞工程技术的基础。哈里森被称为“组织培养之父”。

1、 培养细胞的类型和特点

大多数体外培养的细胞是在培养皿和瓶子等容器中培养的。根据其生长特点,可分为附着型和悬浮型。

1.贴壁型:大多数培养的细胞都是贴壁型的,它们必须粘附在支架表面才能生长。这种细胞在体内有其特殊的形状。然而,由于在体外粘附支架后形态学的简化,它们在体内失去了一些原有的特征,显示出更多的上皮样细胞或成纤维细胞。

特征:接触抑制是正常贴壁细胞的接触抑制特征。当细胞相互接触时,细胞的运动受到抑制,因此细胞不会相互重叠生长。密度抑制是指细胞生长。虽然在合并成片剂后会发生接触抑制,但只要有足够的营养,细胞仍然可以增殖和分裂。然而,当细胞数量达到一定密度时,由于营养物质的消耗和代谢产物的影响,细胞分裂停止,称为密度抑制。

2.悬浮型:少数细胞在培养过程中悬浮生长,不粘附支架,包括血液、脾脏或骨髓中的一些细胞,特别是白细胞和一些肿瘤细胞。当细胞悬浮生长时,它们可以是单个细胞或小细胞团,细胞体是圆形的。本实用新型的优点是生长在培养基和生活空间中,可长期生长,易于繁殖。

2、 培养细胞增殖过程

培养细胞的生命周期是指细胞在培养过程中不断增殖和生长的时间。一般可分为原始文化期、传承期和衰落期。从体内取出细胞,培养至第一代,即原代培养,通常持续1-4周。

一旦原代细胞被传代,它被称为细胞系并进入传代期,这是其生命周期中持续时间最长的时期。细胞增殖旺盛,能维持二倍体细胞的核型。一般可传代10-50次,然后细胞增殖减慢至完全停止,细胞进入衰退期,最终死亡。

肿瘤细胞系可以无限增殖而不衰退,正常细胞系也可以在传代或衰退结束时自发转化。获得永久增殖能力的细胞称为无限细胞系或连续细胞系。

3、 培养细胞一代的增殖过程

培养的细胞生活在培养瓶、培养皿或其他容器中,生活空间相对隔离,营养有限。当细胞增殖到一定密度时,部分细胞需要分离并接种到其他容器中,培养基需要及时更新,否则会影响细胞的存活。这个过程称为通过。

从细胞接种到下一代培养的时间称为第一代。值得注意的是,细胞培养产生的概念与细胞增殖的概念不同,后者是指细胞数量加倍。一般来说,在第一代细胞培养过程中,细胞可以加倍2到6倍。

细胞出生后一般经历三个阶段:潜伏期、指数生长期和平台期。随着分裂细胞的出现逐渐增多,细胞群进入指数增长阶段,也称为对数阶段。细胞增殖旺盛,呈指数增长,活力最强,适合实验研究;由于这一时期的持续时间与细胞特征不完全相同,因此细胞本身、接种密度和血清浓度通常持续3-5天。

随着细胞数量的增加,细胞相互接触形成片剂。由于接触抑制和密度抑制,细胞停止分裂和繁殖。在高原期,细胞数量不会增加,但仍保持一定的活力。此时应及时分离传代,否则细胞会因中毒而改变甚至死亡。悬浮细胞通常没有潜伏期。接种后,新鲜培养基可迅速进入指数生长期。

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