单克隆抗体技术的核心是将骨髓瘤细胞与特定抗原免疫刺激的B淋巴细胞融合，获得杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在体外不仅能像骨髓瘤细胞一样无限增殖，而且具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此，单克隆抗体技术又称杂交瘤技术。下面由莱德伯特（北京）生物科技有限公司为大家介绍一下单克隆抗体。

1987年10月15日，三位免疫学家杰尼、科勒、米尔斯坦获得1984年诺贝尔医学和生理学奖。杰尼作为丹麦免疫学领域的一位伟大理论家，他提出了三个理论：抗体形成的自然选择学说、抗体多样性的发生学说、免疫系统的网络学说，开创了免疫学的新时代，为建立现代免疫学奠定了基础。科勒是德国免疫学家，米尔斯坦是英国分子生物学家，这两位杰出的贡献使杂交瘤技术生成了单克隆抗体，并阐明了单克隆抗体技术的原理。

Ig分子的基本结构由一条四肽链组成，两条相同的轻链（L链）和重链（H链）组成。L链和H链是由二硫键形成的四肽链分子，成为Ig分子的单体的基本结构。

IgG由四个多肽（两个轻链和两个重链）组成，它们通过二硫键和非共价键连接，具有Y型分子结构。一端是抗原结合端（氨基端）——可变区（V区），在这里氨基酸序列随着免疫抗原的反应而改变，并且有两个相同的位点可以结合抗原。在另一端（羧基端），氨基酸序列相对恒定——恒定区（C区），它能与具有Fc受体的细胞（如巨噬细胞、K细胞、肥大细胞等）结合，分别产生不同的作用。

HAT系统代表次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）和胸腺嘧啶（T）。他根据一种基于嘌呤和嘧啶生物合成途径分离杂交细胞的特殊培养基。细胞内核苷酸生物合成有两条途径。一是主要途径，叶酸及其衍生物是主要途径。氨基蝶呤抑制二氢叶酸还原酶的活性，从而阻断细胞中DNA的合成。另一种是是补救途径，包括两种酶的参与。一种是HGPRT酶（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶），另一种是TK酶（胸腺嘧啶核苷激酶）。它们分别用次黄嘌呤催化肌苷酸和胸腺嘧啶催化脱氧胸苷合成DNA。H和T为紧急途径提供外源核苷酸“前体”。

核酸的合成主要是由核糖和磷酸合成5-磷酸核糖，在磷酸焦糖磷酸酶的催化下与ATP反应生成1-焦磷酸-5-磷酸核糖（PRPP），PRPP等一系列反应生成次黄嘌呤核苷酸（IMP）。

在氨基蝶呤存在下，核苷酸从头合成IMP的途径被阻断，细胞只能通过HGPRT使次黄嘌呤酸化形成次黄苷酸，然后依次转化为AMP和GMP，即通过“补救途径”依赖外源来合成核苷酸。

因此，HGPRT或TK细胞株不能在含HAT的培养基中生长，但这种细胞可以与能通过HGPRT或TK酶的细胞融合，杂交细胞可以在含HAT的培养基中存活。

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