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单B细胞抗体的制备及应用

发布时间:2021-12-29 14:21      浏览量:2374

单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具。它在蛋白质结构与功能、疾病诊断、药效学和临床应用等方面发挥着不可或缺的作用。近年来,随着分子生物学和细胞生物学的发展,单个B细胞抗体的制备技术开始兴起并逐渐得到广泛应用。

采用单B细胞抗体技术制备的单克隆抗体具有全人源性、高特异性和均一性的特点。在治疗病原微生物感染、肿瘤、自身免疫性疾病和器官移植等方面显示出独特的优势和良好的应用前景。目前,单B细胞抗体的制备技术已广泛应用于以下几个方面。

1、病原微生物感染的治疗

其他抗体制备技术,如噬菌体展示和转基因小鼠,只能研究有限种类的B细胞,而单B细胞抗体制备技术可以帮助人们在患者感染或免疫数月甚至数年后快速分离记忆B细胞,制备单克隆抗体。同时,人们可以从基因水平更好地理解和释放人类免疫系统的机制。单B细胞技术已被用于制备针对病原体的高度特异性人类抗体,如HIV抗体、破伤风抗体、乙型肝炎抗体和流感抗体。

2、自身免疫性疾病的检测和治疗

在肿瘤检测和治疗方面,单个B细胞技术也发挥着其他技术无法比拟的重要作用。通过这项技术,Wang等人在伴有葡萄膜炎症状的玻璃体视网膜淋巴瘤患者中发现IgH基因和T细胞受体(TCR)基因重排,建立了一种高灵敏度和特异性的检测原发性玻璃体视网膜淋巴瘤的新方法。Gilbert等人基于单B细胞技术建立了一种新的基于细胞的ELISA,以获得对黑色素瘤细胞具有杀伤作用的抗黑色素瘤抗体。同时,他们发现黑色素瘤患者体内的抗体含量远远高于正常人。

3、人体免疫系统的研究

单B细胞抗体制备技术最突出的应用是治疗和研究自身免疫性疾病和人类免疫系统。单个B细胞抗体的制备技术可以在人体内随时分解成B细胞,这使得详细研究人体免疫系统各个阶段的功能和机制成为可能。Scheel等人发现类风湿性关节炎患者滑膜组织中存在持续激活特定B细胞的现象,导致滑膜组织中大量浆细胞富集。因此,他们得出结论,有淋巴细胞浸润的关节炎患者可以通过早期B细胞排斥疗法减少浆细胞积聚的症状。

Wardemann等人从健康人体中克隆了单个B细胞抗体基因,并对其进行了分析和研究,发现大多数在骨髓早期产生的B细胞具有自身免疫特异性。因此,可以推断,在抗体产生过程中,可能存在两个排除自身免疫的检查点:一个位于骨髓中,另一个位于B细胞具有免疫耐受性的周围组织中。

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从以上对单B细胞抗体制备技术应用的简要介绍可以看出,单B细胞技术具有效率高、人源性全、基因多样性丰富等优点。然而,迄今为止,单B细胞抗体制备技术的应用潜力尚未发挥出来。单B细胞抗体制备技术仍受到一些实际条件的限制,如高通量PCR抗体基因扩增技术不完善、某些靶抗原制备困难、对合适的人类供体需求量大等。然而,在过去十年中,单B细胞抗体制备技术已成为制备人源抗体的常用方法。同时,它也促进了免疫学的研究,包括抗体成熟、疫苗保护机制、疫苗开发、肿瘤和自身免疫性疾病等。

随着B细胞分选技术、后续PCR扩增基因方法和抗体基因高通量分析鉴定的成熟和完善,单B细胞抗体制备技术将在未来的诊断、药效学和临床应用中发挥前所未有的重要作用,引领新治疗性抗体研究的新时代。近年来新兴的单b细胞抗体制备技术是一种体外克隆表达单抗原特异性b细胞抗体基因的技术。该方法保留了轻链和重链可变区自然配对的特点,具有基因多样性好、效率高、人源充足、细胞数量少等优点。莱德伯特(北京)生物科技有限公司的Beacon这款设备轻松确保 99.5%的单克隆性,常规有限稀释等方法需要多轮操作并结合多种方法来寻找和确认单克隆性,事倍功半。而 Beacon 可直接培养目标细胞,所见即所得,可确保每个 NanoPen 仅有 1 个细胞,自动移除可能存在的多细胞,从而一轮Beacon 就轻松达到 99.5%的单克隆性。

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