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莱德伯特为你介绍杂种细胞的筛选

发布时间:2021-11-22 14:20      浏览量:4025

在两种亲本细胞融合的混合物中,可能有多种类型的细胞。筛选的目的是获得优良的杂交细胞。利用细胞融合技术,可以根据人们的意愿创造新的物种,提取有用的细胞代谢物。由于细胞间融合率相对较低,我们通常得不到预期的融合细胞。在实践中,为了分离出所需的杂交细胞,通常需要融合大量的细胞。另外,细胞间融合是随机的,融合细胞种类繁多,因此杂交细胞的筛选和鉴定是手术过程中非常重要的一步。下面由莱德伯特(北京)生物科技有限公司为大家介绍一下杂种细胞的筛选。

一、常见的杂交细胞筛选方法

1、基于酶缺陷细胞和耐药性的杂交筛选。

2、基于营养缺乏细胞的杂交筛选。

3、温度敏感型杂交细胞的筛选。

4、筛选具有理想性状的杂交细胞。

二、植物细胞的筛选方法

1、遗传互补筛选法:利用每个亲本贡献一个功能性等位基因,纠正另一亲本的缺陷,使杂交细胞表现正常。

2、抗性互补筛选法:根据亲本细胞原生质体对抗生素、除草剂等有毒物质的抗性差异,筛选出杂交细胞。

3、利用物理特性筛选法:根据原生质体大小、颜色、悬浮密度、电泳迁移率和亲本愈伤组织的差异筛选杂交细胞。

4、生长特性筛选方法:根据原生质体对培养基组成的要求和反应的差异选择杂交细胞。

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三、动物细胞的筛选方法

1、利用抗药性筛选系统:根据生物细胞对药物敏感性的差异,筛选出杂交细胞,并可在含有两种抗生素的培养基上生长。

2、营养补充筛选系统:在缺乏一种或多种营养物质的情况下,细胞不能生长和繁殖,即营养缺乏细胞。利用亲本细胞营养液互补原理筛选杂交细胞。杂交细胞在不含色氨酸和苏氨酸的培养基上培养,亲本细胞全部死亡。

3、温度敏感突变型杂种细胞的筛选:培养的细胞一般在32℃~40℃生长,但温度敏感突变型的细胞可以在高温或低温下生长。因此,筛选出杂交细胞。杂交种可以在高温和含卡那霉素的培养基上生长。

四、杂交细胞在细胞生物学研究中的应用

1、基因定位:当不同种类的细胞融合时,一个亲本细胞的染色体将被优先排除,而另一个亲本细胞的染色体将被选择性保留,即染色体分离。因此,在特定的染色体上可以识别与表型性状相对应的表型和基因。

2、体细胞杂种的致瘤性分析:通过正常二倍体细胞与致瘤性或病毒转化细胞的融合来进行致瘤性的遗传分析。

3、遗传缺陷的基因互补:根据杂种细胞的遗传互补性,可分为基因间互补和基因内互补,即杂种细胞可以具有遗传表型的双亲遗传缺陷。通过这种基因互补性,正常基因可以用来治疗由突变或基因缺失引起的疾病。

4、分化功能和表达调控的研究:通过细胞融合,可以实现不同类型细胞分化状态或组织结构的存活和杂交,并对杂交细胞的基因组和细胞质进行观察和分析,了解相互作用如何导致基因的表达分化或排斥的原始特征。

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